背景:
博來霉素(Zeocin)是一種從Streptomyces verticillus分離得到糖肽類銅離子螯合抗生素,博來霉素呈現(xiàn)淺藍色。當與銅離子螯合時,博來霉素沒有毒性作用。當其進入細胞內,銅離子會被還原并移除,此時博來霉素會發(fā)揮其毒性,通過插入DNA中,使DNA裂開,導致細胞死亡。基因Sh ble編碼一種大小約14kDa的蛋白質,可使表達該基因的細胞獲得對Zeocin的抗性。該蛋白可與Zeocin抗生素結合,阻止其與DNA結合,從而使細胞獲得對Zeocin的抗性。
在Escherichia coli中,博來霉素的選擇濃度范圍推薦為25-50 μg/ml,含博來霉素的LB平板(yeast extract 5 g/l, Tryptone 10 g/l, NaCl 5 g/l, Agar 15 g/l, pH 7.5)可在4℃保存1個月。在哺乳動物細胞中,博來霉素的選擇濃度范圍為50-1000 μg/ml,常規(guī)為250-400μg/ml,應針對每種細胞系進行優(yōu)化。
用途:
用于細菌、真菌轉化和哺乳動物轉染系統(tǒng)中耐藥細胞的選擇。
包裝規(guī)格:
貨號 |
規(guī)格 |
濃度 |
性狀 |
RA-AD05 |
0.5ml |
100mg/ml |
無菌水溶液 |
保藏條件/穩(wěn)定性:
冷凍運輸。-20℃避光保存。儲存合理的情況下,可穩(wěn)定保存6個月。
注意事項:
1. 當操作博來霉素溶液時請戴手套、穿著實驗服、佩戴防護眼鏡;
2. 博來霉素對光敏感。請避光保存含博來霉素的抗性平板、培養(yǎng)基;
3. 使用博來霉素作為E.coli的篩選抗生素時,請使用低鹽(NaCl 5 g/L)的LB培養(yǎng)基,pH請調節(jié)至7.5,過酸或者過堿的培養(yǎng)基都會抑制博來霉素的活性;
4. 請將博來霉素保存在-20℃,使用時在冰上融化。