背景：

       抗體依賴的細胞介導的細胞毒性作用（Antibody-dependent cell-mediated cytotoxicity, ADCC）是免疫系統對抗病毒感染及腫瘤疾病的一種重要免疫防御機制。抗體通過與靶細胞表面抗原特異性結合，招募如自然殺傷（Natural killer, NK）細胞等效應細胞殺死靶細胞。NK細胞表面表達FcγRIIIa蛋白，是一種抗體Fc區域的受體，能識別并結合抗體的Fc端，從而使NK細胞結合到靶細胞周圍。一旦Fc受體與抗體的Fc區域結合，NK細胞就會釋放細胞因子和細胞毒性顆粒，進入靶細胞觸發細胞凋亡。傳統的ADCC檢測方法是利用外周血單核細胞（Peripheral blood mononuclear cells, PBMCs）或者從其中分離得到NK細胞作為效應細胞進行檢測，該方法的效應細胞較難獲取，且方法變異性大、操作繁瑣。

       Rhinogen^?ADCC Reporter Bioassay, Complete Kit (BT474) 報告基因檢測系統包含抗Her2抗體ADCC功能檢測所需的靶細胞BT474細胞及抗Her2抗體對照品。如果您的待測抗體能識別BT474細胞上的不同表面抗原，該試劑盒仍舊適用于您抗體的ADCC活性檢測。

       Rhinogen^?ADCC Reporter Bioassay是一種生物發光報告基因檢測方法，用于檢測抗體的ADCC生物學活性。其作用機理基于NFAT（Nuclear factor of activated T-cells）反應通路（圖1）。本系統采用基因工程改造的Jurkat細胞作為效應細胞，該細胞穩定表達FcγRIIIa受體（V158高親和力突變體）和由NFAT應答元件驅動表達的螢火蟲螢光素酶。抗體通過與效應細胞表面FcγRIIIa的結合，激發細胞內NFAT反應元件，NFAT反應元件則驅動螢火蟲熒光素酶的表達。熒光素酶活性通過生物發光進行定量。

圖1.Rhinogen^? ADCC Reporter Bioassay原理圖

產品規格:

特點：

       Rhinogen^?ADCC報告基因檢測系統提供的ADCC生物學活性檢測方法操作具有操作簡便（圖2）、變異性低、靈敏度高等特點，并可與多種不同的靶細胞搭配使用。

       1. 原理明確：基于抗體結合細胞對效應細胞FcγRIIIa受體信號通路的激活；

       2. 應用廣泛：治療性抗體藥物的Fc功能學研究和產品質控、ADCC作用機制研究；

       3. 操作簡便：檢測過程簡單，檢測試劑易用；

       4. 適用性廣：該系統已完成針對懸浮或貼壁的多種靶細胞的適用性驗證，效果良好；

       5. 靈敏度高：可靈敏的檢測到抗體糖型的改變；

       6. 穩定性好：傳代30次仍可穩定靈敏檢測，數據重復性好。

       Rhinogen^?ADCC報告基因檢測系統的各項特性使得其可作為抗體篩選、抗體糖基化修飾等研究的有效手段。同時，該法可作為抗體藥物ADCC活性的常規檢測方法及批簽發檢測指標。

圖2. Rhinogen^? ADCC Reporter Bioassay檢測流程圖

運輸及存儲：

       運輸方式：干冰運輸

       儲       存：收到細胞后，請立即將ADCC Bioassay效應細胞及BT474靶細胞凍存管轉移至-140°C以下的保存條件長期保存。抗Her2抗體請保存在-20℃。