背景：

       糜蛋白酶（chymotrypsin）也叫胰凝乳蛋白酶，屬于絲氨酸蛋白酶家族，能專一性水解芳香族氨基酸羧基形成的肽鍵。糜蛋白酶原由胰腺分泌，隨胰液進入小腸后，在Arg 15 和Ile 16之間（按Bovine chymotrypsin A 序列編號）被胰蛋白酶切為通過二硫鍵連接的兩部分，隨后糜蛋白酶在Leu 13 酶切去短肽Ser 14-Arg 15，在Tyr 146 和Asn 148 酶切去短肽Tyr 147-Asn 148，形成由二硫鍵相連的三條肽鏈并具有生物活性。

       Rhinogen^? Chymotrypsin (Sequencing Grade)是利用重組畢赤酵母系統(tǒng)重組表達并經(jīng)過多步層析純化得到重組糜蛋白酶原，通過激活（胰蛋白酶和自身水解）后獲得的活性糜蛋白酶，純度≥95%，如下圖。其氨基酸序列與人源糜蛋白酶序列完全一致，分子量大小約為25kDa。可選擇性水解芳香族氨基酸如：酪氨酸、苯丙氨酸和色氨酸的C 端形成的肽鍵，也可以較慢的速率緩慢水解由亮氨酸和蛋氨酸形成的肽鍵，還可作用于敏感氨基酸形成的酯。

包裝規(guī)格：

       Rhinogen^? Chymotrypsin (Sequencing Grade)包裝規(guī)格如下：

       QIP-002是以凍干粉形式提供。

產(chǎn)品來源：

       Rhinogen^? Endoproteinase Lys-C是利用重組E. coli表達系統(tǒng)表達的重組賴氨酰內(nèi)切酶，分子量大小約31±3.1kD。

產(chǎn)品質(zhì)量：

       最適pH為7.0-9.5。

儲存條件：

       1. 采用藍冰保溫運輸，收到產(chǎn)品后請立即將酶置于-20℃，密封防潮。

       2. 使用50mM HAc溶解后，2-8℃存放，2天內(nèi)使用；或溶液分裝后存于-20℃以下，有效期24個月。避免室溫下長時間放置，避免反復凍融。

產(chǎn)品特點：

       Rhinogen^? Chymotrypsin (Sequencing Grade)是一種高度純化和非常穩(wěn)定的重組蛋白酶，具有穩(wěn)定性高、比活性高等特點。適用于蛋白質(zhì)組學研究中肽譜圖、肽指紋譜或蛋白序列分析。

       1. 高純度：宿主蛋白殘留小于生物制品限度要求，純度≥95％；

       2. 無動物源性：重組生產(chǎn)，無外源性的病毒污染，生產(chǎn)過程不使用任何動物源原料； 

       3. 高穩(wěn)定性：每批產(chǎn)品都經(jīng)過嚴格的質(zhì)量控制，以實現(xiàn)產(chǎn)品批間穩(wěn)定性；

       4. 高比活性：比活（單位/mg）≥2000USP units/mg。

應   用：

       1. 蛋白質(zhì)組學研究；

       2. 肽譜圖、肽指紋譜或蛋白序列分析。

使用建議：

       1、試劑準備：

       1）使用前，請將Rhinogen^?  Endoproteinase Lys-C取出，10000rpm離心10秒，確保所有干粉都在管底；

       2）用50mM HAc 將Rhinogen^? Chymotrypsin (Sequencing Grade)干粉溶解成1-10mg/ml溶液。

       2、推薦使用方法：

       在蛋白消化中，用50mM 或100mM 的NH4HCO3 溶解目的蛋白，然后加入一定量的酶溶液，使酶量：目的蛋白（質(zhì)量比）=1：50。最適反應溫度為30℃，溫度超過37℃后酶會發(fā)生自切。

       注意：對于不同的蛋白樣品，需要實驗摸索最適的酶濃度及反應時間。

操作說明：

       本產(chǎn)品僅供研究使用，不適用于人或動的物診斷及治療用途。