背景：

       蛋白內切酶Glu-C(又稱V8蛋白酶、谷氨酰胺內切酶、天冬酰胺內切酶、金黃色葡萄菌V8蛋白酶)屬于絲氨酸蛋白酶家族，能特異水解谷氨酸(Glu)或天冬氨酸(Asp)殘基羧基端肽鍵。其特異性受緩沖液組分直接影響，在pH7.8的NH4HCO3和pH4.0的CH3COONH4緩沖液中識別并切割Glu羧基端肽鍵，在pH7.8的磷酸鹽緩沖液中識別并切割Glu或Asp羧基端肽鍵，且對Glu的水解速率高于Asp。

       Rhinogen^? Glu-C (Sequencing Grade)是利用重組大腸桿菌系統表達并經過多步層析純化得到的重組蛋白酶，分子量大小約為24kD，可以單獨使用或與其它蛋白酶搭配用于蛋白質酶切測序、肽圖譜分析和肽指紋圖譜分析。其在pH4.0-9.0之間均有活性，最適pH為8.0-8.5。V8蛋白酶的抑制劑有二異丙基氟磷酸（DFP）、α2-巨球蛋白和Nα-P-甲苯磺酰基-L-賴氨酸氯甲基酮（TLCK）。

包裝規格：

       Rhinogen^? Trypsin (Sequencing Grade)包裝規格如下：

       QIP-005是以凍干粉形式提供。

產品來源：

       Rhinogen^? Glu-C (Sequencing Grade)是利用重組大腸桿菌系統表達生產并經過多步層析純化得到的重組蛋白酶，分子量大小約為24kDa。

產品質量：

       SDS-PAGE分析，純度≥95%；沒有檢測到污染的蛋白酶活性。

產品特性：

       在pH4.0-9.0之間均有活性，最適pH為8.0-8.5。

儲存條件：

       1.采用冰袋運輸，收到產品后請立即將酶置于-20℃，密封防潮。

       2.使用水或50mM pH8.0Tris-HCl溶解成0.5mg/ml后，存于-20℃以下，6個月穩定；存于2-8℃（無菌），2個月穩定；25℃或37℃條件下12h，活性可維持85%以上；避免室溫下長時間放置，建議分裝儲存，避免多次反復凍融。

產品特點：

       Rhinogen^? Glu-C (Sequencing Grade)是一種高度純化和非常穩定的重組蛋白酶，具有穩定性高、比活性高等特點。適用于蛋白質組學研究中肽譜圖、肽指紋譜或蛋白序列分析。

       1. 高純度：沒有污染蛋白酶，純度≥95％；

       2. 高穩定性：每批產品都經過嚴格的質量控制，以實現產品批間穩定性；

       3. 無動物源性：重組生產，無外源性的病毒污染，生產過程不使用任任何動物源原料。

應用：

       1. 肽譜圖、肽指紋譜或蛋白序列分析；

       2. 蛋白質組學研究。

使用建議：

       1、試劑準備：

       1）使用水或50mM pH8.0 Tris-HCl溶解干粉，得到濃度為0.5mg/ml-1mg/ml的Glu-C溶液。溶解后建議根據單次使用量進行分裝，最大限度避免污染或自切。

       2、推薦使用方法：

       1） 目的蛋白溶解：用酶切緩沖液（如采用25-50mM pH7.8 NH₄HCO₃緩沖液）溶解目的蛋白，若目的蛋白溶解度低，可以考慮對目的蛋白進行變性處理（如添加尿素、SDS、DTT或加熱）。尿素和SDS對Glu-C蛋白酶的影響見下表：

       2）目的蛋白酶切：Glu-C蛋白酶的使用量推薦為，Glu-C蛋白酶：目的蛋白=1:20-1:100(w/w) ，最適pH為8.0-8.5，25℃或37℃酶切2-18hr。

       注意：對于不同的蛋白樣品，需要實驗摸索最適的酶濃度及反應時間。

操作說明：

       本產品僅供研究使用，不適用于人或動物的診斷及治療用途。