背景:
報告基因檢測是基因表達調(diào)節(jié)研究的重要手段,目前已被廣泛應用于分子生物學及細胞生物學研究領域。報告基因檢測法是一種將轉(zhuǎn)錄調(diào)控和報告基因(如熒光素酶)偶聯(lián)表達,通過報告基因表達產(chǎn)物(如熒光素酶)活性的測定判斷細胞刺激物(如小分子化合物、重組蛋白)生物學活性的方法,《中國藥典》2015年版已將報告基因檢測方法列為干擾素活性測定法第二法(通則3523)。目前在生物制品PD1/PD-L1、IL6/IL6R等相關單抗藥物的生物學活性檢測和Fc效應功能研究中,報告基因檢測法已經(jīng)起到了至關重要的作用。以往只能采用體內(nèi)動物學活性研究的細胞因子如EPO、GH、FSH、TSH等,也在逐步采取體外報告基因檢測法替代原有的動物體內(nèi)法作為產(chǎn)品批放行的關鍵指標。轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)與報告基因的表達相結(jié)合通常用于廣泛的生理學研究,例如通過量化特定受體反應元件對基因表達的作用來分析受體功能,或者用來進行信號轉(zhuǎn)導、轉(zhuǎn)錄因子、蛋白質(zhì)與蛋白質(zhì)相互作用和病毒感染和傳播的研究,轉(zhuǎn)錄下游的事件,如mRNA加工和蛋白質(zhì)折疊,也可以被分析。因此,熒光素酶被廣泛應用于生物技術和制藥行業(yè)。
螢火蟲熒光素酶(Firefly Luciferase)是一種分子量為61kDa的蛋白,因其在宿主細胞中無背景螢光,同時無需翻譯后修飾,檢測快速、可靠和方便,是應用螢火蟲熒光素酶報告基因系統(tǒng)檢測的理想選擇。本試劑盒以D-熒光素(D-luciferin)為底物,在ATP、鎂離子和氧氣存在的條件下,可以被螢火蟲熒光素酶催化進行氧化脫羧反應,產(chǎn)生激活態(tài)的氧化熒光素(Oxyluciferin),并產(chǎn)生生物螢光(Bioluminescence)(圖1)。生物螢光與熒光素酶的啟動子活性成比例,間接反映了細胞刺激物的生物學活性。
產(chǎn)品規(guī)格:
名稱 |
貨號 |
規(guī)格 |
Bio-BrightTM One-Step螢火蟲熒光素酶測定試劑盒 |
RA-GL07 |
50ml |
試劑盒組分: |
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? 熒光素酶反應底物(凍干粉) |
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1Vial |
? 熒光素酶反應緩沖液 |
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50ml |
Bio-BrightTM One-Step 螢火蟲熒光素酶分析試劑盒主要適用于需要超高光輸出信號的螢火蟲熒光素酶報告基因系統(tǒng)。