背景：

       來源于Streptococcus Pneumoniae（或Enterococcus Faecalis）的O-糖苷酶（O-Glycosidase，EC 3.2.1.97）是一類重要的糖基化研究的工具酶。Rhinogen^?  O-Glycosidase是將來源于Enterococcus Faecalis的O-Glycosidase基因重組并表達于大腸桿菌BL21中的重組酶，能夠將糖蛋白中Ser或Thr殘基的羥基連接的Core 1（Gal-β(1-3)-GalNAc-）及Core 3（GlcNAc-β(1-3)-GalNAc-）O-連雙糖釋放下來，如圖1。該酶對α-GalNAc結合是特異性的，但對于Ser或Thr殘基沒有明顯的偏好，同時糖蛋白的變性與否也不顯著影響O-去糖基化的效率。核心結構的任何修飾都可以阻斷O-Glycosidase的作用，最常見的修飾是核心結構的單、二或三唾液酸化。除此以外，核心結構還可能被巖藻糖，N-乙酰葡糖胺或N-乙酰半乳糖胺殘基進一步取代修飾，核心結構以外的單糖必須通過一系列外切糖苷酶依次切割，直到僅保留Core 1或Core 3二糖核心。然后O-Glycosidase才能夠完整的從Ser或Thr殘基上釋放二糖核心，如圖2。通常O-Glycosidase的使用都需要配合唾液酸酶。

 圖1 Rhinogen^? O-Glycosidase作用O-連二糖核心的類型

圖2  復雜O-聚糖結構的糖鏈釋放

產品包裝：

       Rhinogen^? O-Glycosidase包裝規格如下：

儲存體系：

       QPF-004儲存在緩沖液中，以液體的形式提供。緩沖液的組成為：50 mM NaCl，20 mM Tris-HCl，1 mM EDTA，pH 7.5。

配套試劑：

       Rhinogen^? O-Glycosidase 配套提供的試劑如下：

產品來源：

       Rhinogen^? O-Glycosidase是一種將來源于Enterococcus Faecalis的O-Glycosidase基因重組并表達于大腸桿菌BL21中的重組酶，分子量大小約為147kDa。

產品質量：

       SDS-PAGE分析，純度≥95%；沒有檢測到污染的外切糖苷酶、糖苷內切酶及蛋白酶活性。 

產品特性：

       最適反應pH為7.5；熱失活條件：65°C處理10 min。 

酶活定義：

       1個酶活力單位定義：在100 μl反應體系中，37°C，pH7.5條件下，1小時內從5mg唾液酸酶消化后的非變性fetuin 上催化釋放0.68nmol O-連二糖所需要的酶量。

儲存條件：

       -20℃條件下，避免反復凍融。 

應   用：

       1.O-聚糖結構分析；

       2.糖蛋白生物合成分析；

       3.涉及O-聚糖的病理生理學研究；

       4.治療性重組蛋白的表征及質量控制；

       5.癌癥研究和異常O-糖基化的鑒定及體外診斷。