背景：  

       在生物制品的制備/生產(chǎn)過程中，去除DNA殘留是極為重要的。在過去幾年里，重組蛋白類生物藥物的發(fā)展突飛猛進，并且在未來依然前景廣闊。在微生物系統(tǒng)中，這些重組蛋白一般都是通過微生物的發(fā)酵，并且通過裂解微生物細胞而釋放出來。然而，在釋放出目標產(chǎn)物的同時，細胞裂解物會同時產(chǎn)生一些雜產(chǎn)物，比如宿主細胞蛋白、核酸（DNA以及RNA）、細胞內(nèi)毒素以及一些其他宿主細胞雜質(zhì)。重組蛋白藥物、病毒疫苗等生物制品中的DNA殘留可能會給患者體內(nèi)帶入激活的致癌基因，或者作為潛在的感染病毒DNA致使患者被感染。因此，DNA殘留量是重組蛋白藥物的一個重要的評價標準。世界上許多權(quán)威機構(gòu)都對重組蛋白類藥物中的宿主DNA殘留量做出了嚴格的規(guī)定，對于每支疫苗中的DNA殘留量，WHO規(guī)定不可以超過l0ng，美國FDA規(guī)定不可以超過10pg，我國規(guī)定為100pg以下。

概述：

       Nuclecut^TM全能核酸酶（SuperNuclease）是一種核酸內(nèi)切酶，可將核酸降解成2~5個堿基的5'-單磷酸核苷酸，因其能高效降解任何形式（雙鏈，單鏈，線狀，環(huán)狀）的DNA和RNA而沒有蛋白裂解活性，因此被稱為“全能核酸酶”。全能核酸酶可以非特異性裂解單鏈以及雙鏈的DNA和RNA，并切割出一個3'-OH和5'-磷酸基（如圖1），主要用于重組蛋白、病毒疫苗、細胞和基因治療用病毒載體、溶瘤病毒及其它生物制品中DNA/RNA去除。該酶在0~42℃的均有活性，最適溫度為37℃。有效的pH范圍為6.0-10.0，最適pH為8.0。發(fā)揮活性需要Mg²⁺存在，1-2mM為最佳。在去污劑、SDS、尿素等存在下仍然保持一定活性。

圖1. 全能核酸酶的作用位點

產(chǎn)品包裝：

       Nuclecut^TM GMP級全能核酸酶（SuperNuclease-GMP）包裝規(guī)格如下：

       產(chǎn)品儲存于20mM Tris-HCI，pH8.0，2mM MgCl₂，20mMNaCl和50%（v/v）甘油中，不添加防腐劑。

產(chǎn)品來源：

       Nuclecut^TM GMP級全能核酸酶序列來源于Serratiamarcescens，重組表達于E. coli，單體理論分子量約27.5KD，C端帶6×His標簽。

產(chǎn)品特性：

       全能核酸酶可非特異性降解所有形式的DNA和RNA（單鏈的、雙鏈的、線性的和環(huán)化的），將核酸完全消化為長度為3至5個堿基的5'-單磷酸末端寡核苷酸。

       Nuclecut^TM GMP級全能核酸酶采用非動物源性原料， 不添加抗生素，符合GMP生產(chǎn)標準，滿足法規(guī)要求。適用于重組蛋白、病毒疫苗、細胞和基因治療用病毒載體、溶瘤病毒及其它生物制品中DNA/RNA去除。

產(chǎn)品質(zhì)量：

       1. 高活性：≥1.1×10⁶U/mg 蛋白、≥250U/μl；

       2. 高純度：通過SDS-PAGE檢測，純度≥95%；通過 SEC-HPLC分析確定，純度 ≥99 %；

       3. 無蛋白酶活性：偶氮酪蛋白法分析無蛋白酶活性；

       4. 內(nèi)毒素：由重組C因子法確定每1000 U核酸酶內(nèi)毒素含量< 0.01 EU；

       5. 微生物檢測：< 10 CFU/1×10⁶U。

儲存條件：

       采用干冰運輸，收到產(chǎn)品后請立即將其置于-20℃保存。

應(yīng)用：

       1. 可從重組蛋白及其它生物制品中去除DNA/RNA

       2. 適用于病毒疫苗、細胞和基因治療用病毒載體及溶瘤病毒的純化

       3. 降低由核酸引起的粘度；

       4. 在二維凝膠電泳和色譜中制備樣品

       5. 防止細胞結(jié)塊，尤其是冷凍細胞

       6. 降低哺乳動物細胞提取物的粘度

       7. 降低大腸桿菌細胞裂解液的粘度以增強過濾性

       8. 從包涵體中純化蛋白