背景:
內切糖苷酶 F1(Endo F1)可在寡糖N-連接的二乙酰基殼二糖聚糖核心中的兩個N-乙酰葡糖胺殘基之間進行切割,從而產生截短的糖分子,其中一個N-乙酰葡糖胺殘基則保留在天冬酰胺上。Endo F1可切割天冬酰胺連接的或游離的高甘露糖(低聚甘露糖)和雜合結構,但不是復雜的低聚糖。雜合結構的核心巖藻糖基化會使Endo F1的切割速率降低超過50倍。另外,Endo F1可水解含有高甘露糖鏈的硫酸鹽,可在天然或非變性的去糖基化條件下使用。該酶適用于在天然條件下從糖蛋白中脫糖基化,適用于各種糖組學、蛋白質組學和質譜應用。
Rhinogen? Endo F1序列來源于Elizabethkingia meningoseptica,重組表達于E. coli,C端帶6×His標簽。不同于由Endo H,Endo F1可以從肽和蛋白質中切割高甘露糖和一些雜合型 N-聚糖。
產品規格:
Rhinogen? 內切糖苷酶 F1(Endo F1)包裝規格如下:
目錄號 |
規格 |
QPF-016-A |
0.33U/20μl |
QPF-016-B |
1U/60μl |
QPF-016-C |
3.3U/200μl |
配套試劑:
Rhinogen? 內切糖苷酶 F1(Endo F1)配套提供的試劑如下:
試劑 |
成分 |
規格 |
10×Glyco緩沖液5 |
500mMsodium phosphate,pH5.5 |
1ml |
Endo F1序列來源于Elizabethkingiameningoseptica,重組表達于E. coli,理論分子量約32 kDa,C端帶6×His標簽。
產品質量:
1. 高純度:通過SDS-PAGE檢測,純度≥90%;
2. 高活性:比活>16U/mg、活性>17U/ml;
3. 高穩定性:每批產品都經過嚴格的質量控制,以實現產品批間穩定性。酶活定義:
在 37?C、pH 5.5 條件下,在 1 分鐘內催化 1 μM變性核糖核酸酶 B (RNase B) 釋放 N-連接寡糖所需的酶量。
應用:
1. 糖組學;
2. 糖型分析及糖基化位點的確定;
3. 蛋白質組學;
保存條件:
采用冰袋運輸,2-8℃可儲存12個月。避免反復凍融。
使用注意事項:
1. 對于不同的糖蛋白樣品,需要實驗摸索最適的酶濃度及反應時間。
2. 反應體系可以線性擴大。
3. 為防止微生物污染,盡可能無菌取用。
4. 較高的酶濃度可以提高單個糖蛋白的消化效率,需要根據實際情況優化。
5. 可適當分裝以減少多次凍融帶來的活性損失。
6. 本產品僅供研究使用,不適用于人或動的物診斷及治療用途。