背景:

       內(nèi)切糖苷酶 F3（Endo F3）可在寡糖N-連接的二乙酰基殼二糖聚糖核心中的兩個(gè)N-乙酰葡糖胺殘基之間進(jìn)行切割，從而產(chǎn)生截短的糖分子，其中一個(gè)N-乙酰氨基葡萄糖殘基則保留在天冬酰胺上。Endo F3對(duì)寡甘露糖和雜合分子沒(méi)有活性。Endo F3可以較慢的速率切割非巖藻糖基化的雙角和三角復(fù)合寡糖，但僅限于肽連接的寡糖。雙角結(jié)構(gòu)的核心巖藻糖基化可使其活性增加至400倍。核心巖藻糖基雙角結(jié)構(gòu)是Endo F3的有效底物，即使在游離的低聚糖中也是如此。Endo F3還可在游離和蛋白質(zhì)連接的寡糖上對(duì)巖藻糖基化的三甘露糖核心結(jié)構(gòu)進(jìn)行切割。復(fù)合四角聚糖的天然去糖基化需要通過(guò)順序水解為三甘氨酸二乙酰基殼二糖（Man3GlcNAc2）核心，然后再使用Endo F3進(jìn)行切割。

       Rhinogen^? Endo F3序列來(lái)源于Elizabethkingia meningoseptica，重組表達(dá)于E. coli，N端帶MBP融合蛋白，C端帶6×His標(biāo)簽。Rhinogen^? Endo F3 切割游離的或天冬酰胺連接的三觸角或 α-(1-6) 巖藻糖基化的雙觸角寡糖，以及三氨糖基殼二糖核心結(jié)構(gòu)。非巖藻糖基化的雙觸角聚糖也會(huì)被切割，但速度會(huì)降低 40 倍。它在寡糖的二乙酰殼二糖核心中的兩個(gè) N-乙酰氨基葡糖殘基之間裂解，產(chǎn)生一個(gè)截短的糖分子，其中一個(gè) N-乙酰氨基葡糖殘基留在天冬酰胺上。相反，PNGaseF 可完整去除寡糖。α1-3 巖藻糖基化會(huì)抑制酶活性，且對(duì)寡甘露糖和雜合分子沒(méi)有活性。

產(chǎn)品規(guī)格：

       Rhinogen^? 內(nèi)切糖苷酶 F3（Endo F3）包裝規(guī)格如下：

配套試劑：

       Rhinogen^? 內(nèi)切糖苷酶 F3（Endo F3）配套提供的試劑如下：

       Endo F3序列來(lái)源于Elizabethkingiameningoseptica，重組表達(dá)于E. coli，理論分子量約74 kDa，N端帶MBP融合蛋白，C端帶6×His標(biāo)簽。

產(chǎn)品質(zhì)量:

       1. 高純度：通過(guò)SDS-PAGE檢測(cè)，純度≥90％；

       2. 高活性：活性＞5U/ml；

酶活定義:

       在 37?C、pH 4.5 條件下，在 1 分鐘內(nèi)催化 1 μM豬纖維蛋白原釋放 N-連接寡糖所需的酶量。

應(yīng)用:

       1. 糖組學(xué)；

       2. 糖型分析及糖基化位點(diǎn)的確定；

       3. 蛋白質(zhì)組學(xué)；

保存條件：

       采用冰袋運(yùn)輸，2-8℃可儲(chǔ)存12個(gè)月。避免反復(fù)凍融。

使用注意事項(xiàng)：

       1. 對(duì)于不同的糖蛋白樣品，需要實(shí)驗(yàn)摸索最適的酶濃度及反應(yīng)時(shí)間。

       2. 反應(yīng)體系可以線性擴(kuò)大。

       3. 為防止微生物污染，盡可能無(wú)菌取用。

       4. 較高的酶濃度可以提高單個(gè)糖蛋白的消化效率，需要根據(jù)實(shí)際情況優(yōu)化。

       5. 適當(dāng)分裝以減少多次凍融帶來(lái)的活性損失。

       6. 本產(chǎn)品僅供研究使用，不適用于人或動(dòng)的物診斷及治療用途。