細胞活性是指樣本群體中健康細胞所占的比例，受培養(yǎng)參數(shù)改變、藥物、生長因子及各種疾病因素影響。例如，癌細胞活性增強，引起細胞異常增殖、逃避細胞凋亡；神經(jīng)退行性疾病和其他組織退行性疾病則表現(xiàn)為程序性細胞死亡；損傷和感染也會對細胞存活產(chǎn)生負面影響， 因此細胞活性檢測對于確認細胞生理狀態(tài)是必須的。
目前已經(jīng)開發(fā)用于不同實驗平臺的多種細胞活性檢測技術(shù)。通常根據(jù)檢測原理可分為基于質(zhì)膜完整性和基于代謝（如ATP代謝和線粒體NADH）的檢測方法。
臺盼藍，也稱二胺藍（Diamine Blue）和加拉藍（Niagra Blue）, 是組織和細胞培養(yǎng)中最常用的死細胞鑒定染料之一。活細胞細胞膜結(jié)構(gòu)完整，能夠排斥臺盼藍，細胞不被染色；通常認為如果細胞膜喪失完整性，即是死細胞。死細胞的胞膜不完整，通透性增加，臺盼藍可滲入并將細胞染成藍色。由此可以簡單、快速地區(qū)分活細胞和死細胞。值得注意的是，如果長時間染色，臺盼藍可通過胞吞或胞飲作用進入細胞。因此染色時間不宜太長， 3~5分鐘即可，否則活細胞也會逐漸積累染料而染成顏色，使檢測結(jié)果偏低。
當兩種染料均存在于細胞核內(nèi)，在合適的吖啶橙、碘化丙啶配比下，兩種染料發(fā)生能量共振轉(zhuǎn)移，死細胞在綠色通道下激發(fā)出紅色熒光。由于吖啶橙和碘化丙啶為DNA結(jié)合染料，因此可有效排除雜質(zhì)以及紅細胞的干擾，確保對樣品進行準確計數(shù)。
羥基熒光素二醋酸鹽琥珀酰亞胺脂（CFSE）是一種可穿透細胞膜的熒光染料，CFSE進入細胞后，可以不可逆地與細胞內(nèi)的氨基結(jié)合，偶聯(lián)到細胞蛋白質(zhì)上。當細胞分裂時，CFSE標記熒光可平均分配至兩個子代細胞中，因此其熒光強度是親代細胞的一半。在一個增殖的細胞群中，各連續(xù)代細胞的熒光強度呈對半遞減，利用流式細胞儀在488nm激發(fā)波長和516nm檢測波長進行分析。常用于淋巴細胞的增殖檢測，也可以用于成纖維細胞、NK細胞等其它細胞的增殖檢測，甚至還可以用于細菌增殖的檢測。
MTT比色法，是一種可用于檢測細胞活力的代謝性檢測方法。其檢測原理為活細胞線粒體中的琥珀酸脫氫酶（SDH）能使外源性MTT還原為水不溶性的藍紫色結(jié)晶甲瓚(Formazan)并沉積在細胞中，而死細胞無此功能。二甲基亞砜（DMSO）能溶解細胞中的甲瓚，用酶標儀在570nm波長處測定其光吸收光值，可間接反映活細胞數(shù)量。
MTT法是較早且較為經(jīng)典的方法。但由于MTT法形成的甲瓚是非水溶性的，需要加有機溶劑溶解，這不僅增加了研究人員的工作量，也給實驗帶來了一定的誤差。一種升級的檢測方法出現(xiàn)了Cell Counting Kit-8，簡稱CCK-8。
CCK-8細胞活性檢測試劑中含有WST-8，一種類似于MTT的化合物，在電子耦合試劑存在的情況下，可以為線粒體內(nèi)的脫氫酶驗明正身。在脫氫酶作用下，WST-8被還原生成橙黃色的甲瓚產(chǎn)物，用酶標儀在OD 450nm波長處測定其光吸收值。細胞增殖越多越快，則顏色越深；細胞毒性越大，則顏色越淺。對于同樣的細胞，顏色的深淺和細胞數(shù)目呈線性關系。
CCK-8操作比MTT要簡單，生成的有色物質(zhì)是橙黃色、可溶于水，在顯色后可直接比色。加入CCK-8后的細胞液仍可以繼續(xù)培養(yǎng)細胞，對細胞毒性相對較小。CCK-8法雖說是MTT法的完美升級版，但是CCK-8試劑的顏色為淡紅色，與含酚紅的培養(yǎng)基顏色接近，在檢測時容易漏加或多加。
