背景:
促甲狀腺激素受體(Thyroid-stimulating hormone receptor, TSHR)主要存在甲狀腺濾泡細胞膜上,在人體生理及病理情況下都發揮著重要作用。TSHR為促甲狀腺激素(Thyroid-stimulating hormone, TSH)的特異性受體,是一種G蛋白偶聯受體,TSH通過與細胞表面的TSHR結合,觸發細胞內cAMP的產生,作為第二信使的cAMP通過識別其位于基因啟動子區的特異性反應元件CRE(cAMP response elements)對下游基因進行調控。TSHR表達細胞株是TSH及TSHR相關研究的有效手段,該方法需對細胞中產生的cAMP進行定量,需要昂貴的試劑盒和繁瑣的ELISA檢測步驟[1]。
圖1. TSHR信號通路[2]
Rhinogen? TSHR Reporter Bioassay是一種生物發光報告基因檢測方法,其作用機理(圖2)基于TSHR反應的主要信號通路cAMP/PKA信號途徑。本系統采用工程改造的中國倉鼠卵巢細胞(Chinese hamster ovary cells,CHO cells)作為測活細胞,該細胞株穩定表達TSHR以及由CRE反應元件驅動表達的螢火蟲熒光素酶。在該細胞中,TSHR的激活觸發cAMP的產生,cAMP則激活熒光素酶基因的表達,而熒光素酶的活性通過生物發光進行定量。
圖2.Rhinogen? TSHR Reporter Bioassay原理圖
產品規格:
目錄號 | 成分 | 規格 |
RA-CK08 |
TSHR報告基因測活細胞(5×106cells/ml) |
1×1ml |
Rhinogen? TSHR報告基因檢測系統提供的TSHR相關生物學活性檢測方法操作具有操作簡便(圖3)、變異性低、量效關系良好、靈敏度高等特點。
1. 原理明確:基于TSHR反應的主要信號通路cAMP/PKA信號途徑;
2. 應用廣泛:可用于TSH的微量測定、TSHR拮抗劑的高通量篩選、TSH和TSHR作用機理研究;
3. 通 量 高:可在96孔、384孔培養板中進行測定;
4. 快速易用:檢測過程簡單,檢測試劑易用;
5. 信噪比高:信號/背景的比率高。
Rhinogen? TSHR報告基因檢測系統的各項特性使得其可作為針對TSH和TSHR相關研究、TSHR藥物篩選及檢測的有效手段。同時,該法可作為針對TSHR藥物的生物學活性常規檢測方法及批簽發檢測指標。
圖3. Rhinogen?TSHR Reporter Bioassay檢測流程圖
運輸及存儲:
運輸方式:干冰運輸
儲 存:收到細胞后,請立即將TSHR報告基因測活細胞凍存管轉移至-140°C以下的保存條件長期保存。
參考文獻:
[1] 王少艷, 馮憑, 方佩華. 人促甲狀腺激素受體的表達及其抗體的檢測. 國際內分泌代謝雜志 Intern J Endocrinol Metab, 2006, 26(3): 178-180
[2] Tetsuo Kondo, Shereen Ezzat and Sylvia L. Asa. Pathogenetic mechanisms in thyroid follicular-cell neoplasia. NATURE REVIEWS CANCER. 2006, 6: 292-306。