背景:
血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(VascularEndothelial GrowthFactor,VEGF),是細(xì)胞內(nèi)刺激血管生成的信號(hào)蛋白,具備促進(jìn)血管新生和再生的功能。細(xì)胞內(nèi)VEGF通過結(jié)合并活化細(xì)胞表面的血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子受體(VascularEndothelial GrowthFactor Receptor,VEGFR,又稱酪氨酸激酶受體),最終導(dǎo)致血管生成。VEGFR有幾種亞型:VEGFR1,VEGFR2,VEGFR3。VEGFR2(又稱KDR)介導(dǎo)幾乎所有已知的受體對(duì)VEGF的細(xì)胞應(yīng)答。VEGF/VEGFR靶點(diǎn)抗體通過特異性的結(jié)合VEGF/VEGFR,從而抑制下游信號(hào)通路,實(shí)現(xiàn)抑制血管生成。
單克隆抗體藥物的生物學(xué)活性作為其關(guān)鍵質(zhì)量屬性在質(zhì)控中備受關(guān)注,目前用于測(cè)定VEGF/VEGFR靶點(diǎn)抗體生物學(xué)活性的經(jīng)典方法為HuVEC增殖抑制法,其工作細(xì)胞為原代細(xì)胞,實(shí)驗(yàn)周期長(zhǎng),變異性大且操作復(fù)雜,為了保證用藥的安全性和時(shí)效性,滿足質(zhì)量檢驗(yàn)的需求,急需建立一種簡(jiǎn)單,快速,精確的檢測(cè)方法用于VEGF/VEGFR靶點(diǎn)抗體生物學(xué)活性檢測(cè)。Rhinogen? VEGF Reporter Bioassay是一種生物發(fā)光報(bào)告基因檢測(cè)方法,其作用機(jī)理(圖1)基于VEGF與KDR的結(jié)合來刺激細(xì)胞應(yīng)答。本系統(tǒng)采用工程改造的HEK293細(xì)胞作為測(cè)活細(xì)胞,該細(xì)胞株穩(wěn)定表達(dá)VEGFR2以及由NF-κB應(yīng)答元件驅(qū)動(dòng)表達(dá)的螢火蟲熒光素酶。當(dāng)VEGF與測(cè)活細(xì)胞結(jié)合時(shí),受體轉(zhuǎn)導(dǎo)細(xì)胞內(nèi)信號(hào)進(jìn)而產(chǎn)生光;Anti -VEGF抗體或Anti -KDR抗體抑制VEGF與KDR結(jié)合會(huì)導(dǎo)致發(fā)光下降。 因此在一定濃度的VEGF存在的情況下,可檢測(cè)不同阻斷劑(如:Anti-VEGF抗體)對(duì)VEGF通路的影響。
圖1. Rhinogen? VEGF Reporter Bioassay原理圖
產(chǎn)品規(guī)格:
目錄號(hào)
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成分
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規(guī)格
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RA-CK24
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VEGF Reporter Bioassay(5×106cells/ml)
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1×1ml
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特點(diǎn):
Rhinogen? VEGF報(bào)告基因檢測(cè)系統(tǒng)具有操作簡(jiǎn)便、變異性低、穩(wěn)定性好等特點(diǎn)。
1. 應(yīng)用廣泛:可作為針對(duì)VEGF/VEGFR靶點(diǎn)藥物篩選及檢測(cè)的有效手段 ;
2. 操作簡(jiǎn)便:檢測(cè)過程簡(jiǎn)單,檢測(cè)試劑易用;
3. 穩(wěn)定性好:傳代20次仍可穩(wěn)定靈敏檢測(cè),數(shù)據(jù)重復(fù)性好。
Rhinogen? VEGF報(bào)告基因檢測(cè)系統(tǒng)的各項(xiàng)特性使得其可作為針對(duì)VEGF靶點(diǎn)藥物篩選及檢測(cè)的有效手段。同時(shí),該法可作為針對(duì)VEGF/VEGFR靶點(diǎn)藥物的生物學(xué)活性常規(guī)檢測(cè)方法及批簽發(fā)檢測(cè)指標(biāo)。
運(yùn)輸及存儲(chǔ):
運(yùn)輸方式:干冰運(yùn)輸
儲(chǔ) 存:收到細(xì)胞后,請(qǐng)立即將細(xì)胞凍存管轉(zhuǎn)移至-140°C以下的保存條件長(zhǎng)期保存。