背景:
胰蛋白酶(Trypsin)屬于絲氨酸蛋白酶家族,能特異性切割多肽鏈中賴氨酸和精氨酸殘基中的羧基。胰蛋白酶原由胰腺分泌,受腸激酶或胰蛋白酶的限制分解成為活化胰蛋白酶,是肽鏈內切酶。它不僅起消化酶的作用,而且還能限制分解糜蛋白酶原、羧肽酶原、磷脂酶原等其它酶的前體,起活化作用,是特異性最強的蛋白酶。
產品包裝:
Rhinogen? QuickTM Trypsin(Sequencing Grade)包裝規格如下:
目錄號 |
規格 |
QIP-012-A |
20μg |
配套試劑:
試劑 | 目錄號 | 規格 |
QuickTM反應增強劑 | EB17-A | 3×1 vial,0.5mg/vial |
Quick? Trypsin酶及QuickTM反應增強劑以凍干粉形式提供。
產品來源:
Rhinogen? QuickTM Trypsin(Sequencing Grade)是利用重組大腸桿菌系統表達生;產并經過多步層析純化得到的重組胰蛋白酶,其氨基酸序列與豬源胰蛋白酶序列同源,分子量大小約為25kDa。
產品質量:
SDS-PAGE分析,純度≥95%;沒有檢測到污染的蛋白酶活性。
產品特性:
最適反應pH:7.0~8.0。
保藏條件:
采用冰袋運輸。收到產品后請立即將置于-20℃,密封防潮。酶溶解后,-70℃存放;若溶解后存于2-8℃,需在24hr內使用完畢;QuickTM 反應增強劑凍干粉溶解后,-70℃可儲存一個月,2-8℃可儲存一周。酶液及QuickTM 反應增強劑溶解后避免室溫下長時間放置,可進行分裝,避免反復凍融。
應用:
1. 在數分鐘內完成抗體或蛋白的完全快速消化;
2. 肽譜圖、肽指紋譜或蛋白序列分析;
3. 蛋白質組學研究;
4. 增加蛋白質序列覆蓋率;
5. 改善溶液內酶解方案。
產品特點:
Rhinogen? QuickTM Trypsin(Sequencing Grade)是一種高度純化和非常穩定的重組蛋白酶,具有穩定性高、比活性高等特點。適用于蛋白質組學研究中肽譜圖、肽指紋譜或蛋白序列分析。
1. 高純度:SDS-PAGE分析,純度≥95%;
2. 高一致性:每批產品都經過嚴格的質量控制,以實現產品批間穩定性;
3. 不自切:重組甲基化修飾突變胰蛋白酶,不自切;
4.無動物源性:重組生產,無外源性的病毒污染,生產過程不使用任何動物源原料;
5. 超高效率:可顯著縮短蛋白質酶解時間,在同一天內完成所有酶解工作,兼容液相色譜(LC)和MS分析。
操作說明:
1. 胰蛋白酶的使用量為胰蛋白酶:目的蛋白=1:20~1:100(w/w),最適pH為7.0~8.0;
2. 反應體積可以按比例放大或縮小;
3. 在酶切反應體系中添加1mM CaCl2,可以提高胰蛋白酶的活性;
4. 反應結束后,取少部分反應體系進行SDS-PAGE或者RP-HPLC檢測,確認酶切效果。剩余反應體系置于冰浴或者凍存。若酶切不完全,則取出反應體系,置于37℃繼續進行反應;
5. 對于不同的蛋白樣品,需要實驗摸索最適的酶濃度及反應時間。可用50mM NH4HCO3或者pH7.0-8.0的緩沖溶液進行酶液稀釋;
6. 本產品僅供研究使用,不適用于人或動物的診斷及治療用途。