背景:
抗體依賴的細胞介導(dǎo)的細胞毒性作用(Antibody-dependent cell-mediated cytotoxicity, ADCC)是免疫系統(tǒng)對抗病毒感染及腫瘤疾病的一種重要免疫防御機制。抗體通過與靶細胞表面抗原特異性結(jié)合,招募如自然殺傷(Natural killer, NK)細胞等效應(yīng)細胞殺死靶細胞。NK細胞表面表達FcγRIIIa蛋白,是一種抗體Fc區(qū)域的受體,能識別并結(jié)合抗體的Fc端,從而使NK細胞結(jié)合到靶細胞周圍。一旦Fc受體與抗體的Fc區(qū)域結(jié)合,NK細胞就會釋放細胞因子和細胞毒性顆粒,進入靶細胞觸發(fā)細胞凋亡。傳統(tǒng)的ADCC檢測方法是利用外周血單核細胞(Peripheral blood mononuclear cells, PBMCs)或者從其中分離得到NK細胞作為效應(yīng)細胞進行檢測,該方法的效應(yīng)細胞較難獲取,且方法變異性大、操作繁瑣。
Rhinogen?ADCC Reporter Bioassay是一種生物發(fā)光報告基因檢測方法,用于檢測抗體的ADCC生物學(xué)活性。其作用機理基于NFAT(Nuclear factor of activated T-cells)反應(yīng)通路(圖NFAT應(yīng)答元件驅(qū)動表達的螢火蟲螢光素酶。抗體通過與效應(yīng)細胞表面FcγRIIIa的結(jié)合,激發(fā)細胞內(nèi)NFAT反應(yīng)元件,NFAT反應(yīng)元件則驅(qū)動螢火蟲熒光素酶的表達。熒光素酶活性通過生物發(fā)光進行定量。
圖1.Rhinogen?ADCC Reporter Bioassay原理圖
包裝規(guī)格:
目錄號 | 規(guī)格 |
RA-CK01 |
1×1ml |
特點:
Rhinogen? ADCC報告基因檢測系統(tǒng)提供的ADCC生物學(xué)活性檢測方法操作具有操作簡便(圖2)、變異性低、靈敏度高等特點,并可與多種不同的靶細胞搭配使用。
1. 原理明確:基于抗體結(jié)合細胞對效應(yīng)細胞FcγRIIIa受體信號通路的激活
2. 應(yīng)用廣泛:治療性抗體藥物的Fc功能學(xué)研究和產(chǎn)品質(zhì)控、ADCC作用機制研究
3. 操作簡便:檢測過程簡單,檢測試劑易用
4. 適用性廣:該系統(tǒng)已完成針對懸浮或貼壁的多種靶細胞的適用性驗證,效果良好
5. 靈敏度高:可靈敏的檢測到抗體糖型的改變
6. 穩(wěn)定性好:傳代30次仍可穩(wěn)定靈敏檢測,數(shù)據(jù)重復(fù)性好
Rhinogen? ADCC報告基因檢測系統(tǒng)的各項特性使得其可作為抗體篩選、抗體糖基化修飾等研究的有效手段。同時,該法可作為抗體藥物ADCC活性的常規(guī)檢測方法及批簽發(fā)檢測指標(biāo)。
圖2.Rhinogen?ADCC Reporter Bioassay檢測流程圖
運輸及儲存:
運輸方式:干冰運輸
儲 存:收到細胞后,請立即將ADCC Bioassay 效應(yīng)細胞凍存管轉(zhuǎn)移至-140°C以下的保存條件長期保存。